Анализ на Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (АССР, anti-CCP) в KDL

Антитела к циклическому цитруллиновому пептиду (АЦЦП, A-CCP)

– гетерогенные специфические иммуноглобулины, взаимодействующие с антигенами белков, содержащих цитруллин. Являются лабораторными признаками ревматоидного артрита. Тест на anti-CCP применяется для ранней диагностики заболевания, его дифференциации от аутоиммунных патологий с суставным синдромом, оценки вероятности деструкции суставов у лиц с подтвержденным диагнозом. Исследованию методом ИФА подвергается сыворотка венозной крови. Коридор референсных значений – 0-5 Ед/мл., данные подготавливаются в течение 1 рабочего дня.

Показания
Подготовка к анализу
Нормальные значения
Повышение показателя
Лечение отклонений от нормы
Цены в Москве

Цитруллин – продукт метаболизма, образующийся из аминокислоты. Он не участвует в производстве белков, полностью выводится из организма. Ревматоидный артрит сопровождается изменением ферментного состава, увеличением концентрации аргининдезаминазы. Под ее воздействием цитруллин встраивается в пептиды. Образовавшиеся комплексы являются чужеродными организму, иммунная система запускает выработку специфических иммуноглобулинов. Антитела к циклическому цитруллиновому пептиду – лабораторный признак раннего ревматоидного артрита. Преимуществом исследования АЦЦП является высокая специфичность, ограничением – отсутствие корреляции между уровнем антител и активностью патологических процессов.

Содержание

Что такое цитруллин

Цитруллин — обычный метаболит, представленный повсеместно в организме, он является нестандартной аминокислотой, так как не может быть интегрирован в белок в процессе его синтеза. Цитруллинсодержащие белки могут образовываться только в ходе посттрансляционной модификации аргининовых остатков — реакции, катализируемой пептидил-аргининдеиминазой.
Цитруллинирование — это процесс, в котором формируются цитруллинсодержащие белки. Реакция цитруллинирования привлекла повышенное внимание ревматологов, поскольку у больных с ревматоидным артритом (РА) выявляются аутоантитела, направленные против белков, содержащих цитруллин.

Антитела к ЦЦП

Иммуноглобулины, продуцируемые в ответ на протеины, содержащие цитруллин, относятся, в основном, к классу G (IgG). Они проявляют довольно высокую специфичность и определяются у 80 – 90% пациентов, которые пока не особо подозревают о развитии РА, можно сказать, задолго до дебюта болезни, еще на доклинической стадии.

Как известно, ревматоидный артрит относят к весьма распространенным системным патологическим процессам аутоиммунного характера, поражающим до 2% жителей планеты. Однако симптомы, проявляющиеся при ревматоидном артрите, могут быть свидетельством других ревматических заболеваний, что затрудняет дифференциальную диагностику.

A-CCP обнаруживаются намного чаще и раньше, нежели привычный для всех маркер, который называют ревматоидным фактором (РФ). К его исследованию в первую очередь прибегают при подозрении на РА, но он подает сигнал о патологических изменениях только спустя некоторое время (≈ 45 дней) от начала их развития. Исследование АЦЦП показывает не только разгар болезни, анализ крови, выявляющий АЦЦП (титр – повышен), может сигнализировать о приближающейся опасности за год-два, что весьма существенно в плане выявления болезни на начальном этапе и ее раннего лечения, пока в суставах не произошли необратимые дегенеративные и деструктивные изменения.

Физиологическая роль

Процесс цитруллинирования наблюдается в ходе естественных физиологических и патологических процессов в организме человека и играет свою роль в процессах клеточной дифференциации и апоптоза. К цитруллинированным антигенам синовиальных тканей относят: цитруллинированный виментин, цитруллинированный филаггрин, цитруллинированные α-и β-цепи фибрина, цитруллинированные пептиды, входящие в состав коллагенов І и ІІ типа.
В ходе разработки методов определения антител к цитруллинированным антигенам было показано, что использование синтетических циклических форм цитруллинированных пептидов обеспечивает большую чувствительность теста. Антитела к циклическому цитруллинированному пептиду в настоящее время признаны информативным серологическим маркером РА.

Процедура анализа

Материалом для исследования является венозная кровь. Для получения сыворотки биоматериал обрабатывается в центрифуге.

Для выявления концентрации антител применяют 3 метода:

иммунофлюоресцентный – обработка искомых антител флюоресцирующим веществом с последующим изучением образца сыворотки под микроскопом;
хемилюминесцентный – подсвечивание антител под воздействием химических соединений;
иммуноферментный анализ с применением тестов 2 поколения — считается предпочтительным, отличается простотой регистрации и стабильностью соединений «фермент-искомое антитело». Позволяет осуществить, как качественный (антитела присутствуют/отсутствуют), так и количественный анализ.

Результаты несрочного теста можно получить через 1–3 дня, срочного – через несколько часов после взятия биоматериала.

Клиническая значимость

Ревматоидный артрит — распространённое системное аутоиммунное заболевание, которое затрагивает около 0,5-1% населения. Эта болезнь вызывает прогрессирующее разрушение и деформацию суставов, может иметь внесуставные проявления. Ранний диагноз и соответствующая терапия ревматоидного артрита имеют решающее значение для исходов заболевания. К числу традиционных тестов серологической диагностики РА относят определение рефматоидного фактора (РФ).

Однако определение РФ имеет два существенных ограничения. Во-первых, специфичность этого теста для РА является достаточно низкой: РФ обнаруживается примерно у 5% здоровых людей, у 5-25% лиц пожилого возраста, а также у значительного числа больных с хроническими заболеваниями. Так, классический IgM-РФ выявляется у 30-35% больных с системной красной волчанкой и системной склеродермией, 20% больных с дерматомиозитом, узелковым полиартериитом и болезнью Бехтерева, 10-15% больных с псориатическим артритом, болезнью Рейтера, сифилисом, туберкулезом, саркоидозом, хроническим активным гепатитом. При наличии суставного синдрома IgM-РФ-позитивными оказываются 25-50% больных с инфекционным эндокардитом, 45-70% — с первичным билиарным циррозом печени, 20-75% — с гепатитом В или С, 15-65% — с другими вирусными инфекциями, 5-25% — с опухолями. Во-вторых, наличие РФ не является стабильным. Частота выявления РФ существенно зависит от длительности заболевания: в первые 6 месяцев он выявляется лишь у 15-43% больных РА, в последующем часть РФ-негативных пациентов становятся РФ-позитивными. Под влиянием лечения возможна и обратная трансформация.

В 2007 году Европейской лигой против ревматизма (EULAR) были опубликованы нормативы для диагностики раннего РА, и определение аутоантител против ЦЦП было отнесено к серологическому маркеру.

Эти аутоантитела могут появляться в сыворотке крови за 1 год до начала заболевания, и их встречаемость в дебюте РА составляет 40-50%, что значительно выше встречаемости РФ, которая не превышает 10-15% в начале заболевания. Именно благодаря высокой встречаемости в дебюте РА, а также специфичности, близкой к 95% (против 70% для РФ), определение анти-ЦЦП стало золотым стандартом диагностики раннего РА. В большинстве случаев иммунологическое подтверждение клинического диагноза дебюта РА становится основой раннего назначения терапии и сохранения функции суставов у пациентов с этим тяжелым заболеванием.

Кроме того, тест позволяет дифференцировать эрозивную и неэрозивную формы РА. У анти-ЦЦП положительных пациентов отмечается большая степень повреждения хряща по сравнению с анти-ЦЦП отрицательными пациентами. Прогностическая ценность метода возрастает, если его используют в комбинации с РФ.

Этот тест позволяет дифференцировать РА с другими заболеваниями соединительной ткани. Анти-ЦЦП могут быть обнаружены в 30% случаев серонегативного ревматоидного артрита(отрицательного по РФ). Продемонстрирована целесообразность применения этого теста в ранней диагностике артрита и в целях прогноза недавно развившегося РА (анти-ЦЦП больше ассоциированы с прогрессией и эрозивными артритами, чем РФ).

Использование анти-ЦЦП в целях мониторинга активности процесса не рекомендовано (корреляции с маркёрами активности, в т. ч. СОЭ, СРБ, не выявлено). В крупномасштабных клинических исследованиях установлено, что уровень анти-ЦЦП-антител остается стабильным по меньшей мере в течение первых 3-5 лет ревматоидного артрита.

Наличие антител к циклическому цитруллинированному пептиду на момент установления диагноза предвещает более агрессивное течение заболевания и более выраженное рентгенологическое прогрессирование, несмотря на проводимую терапию. Последующие колебания уровня этих антител не отражают изменения активности заболевания.

Ни НПВП, ни глюкокортикостероиды, ни большинство базисных препаратов не влияют на уровень анти-ЦЦП, что позволяет сделать вывод, что для контроля эффективности лечения данный тест непригоден, так как на фоне применения большинства базисных и симптоматических препаратов не происходит достоверного снижения уровня антител.

Интерпретация результата

Повышение значений:

Ревматоидный артрит (клиническая чувствительность — 70,6%, специфичность общая — 98,2%).
В некоторых случаях других заболеваний соединительной ткани, особенно СКВ (системная красная волчанка).

Исследуемый материал:сыворотка крови.

Метод определения:иммунохемилюминисцентный, Abbot Architect 2000i.

Температурный режим хранения и транспортировки:

Цельная кровь	Плазма EDTA
18-25°C	22 часа	22 часа
2-8°C	—	7 дней
-20°C	—	3 мес

Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Необходимость проведения анализа

Анализ крови на АЦЦП следует осуществлять при наличии абсолютных показаний, либо появлении характерных симптомов.

Среди последних выделяют:

болевой синдром и отечность в мелких суставах (стопы и кисти) – если эти проявления стабильно присутствуют на протяжении 2 месяцев;
утренняя скованность движений, при этом внешний вид и размеры суставов не изменены;
боль в коленных и локтевых суставах, а также суставах, соединяющих кисть с предплечьем и голень со стопой – если симптом не сопровождает инфекцию.

Помимо этого анализ необходимо сдавать людям, близкие родственники которых страдают ревматоидным артритом. В таких случаях исследование следует проводить регулярно на протяжении всей жизни.

Список используемой литературы

С. В. Лапин, А. А. Тотолян. Антитела к цитруллинированным антигенам.// Лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний. Журнал «Terra Medica nova» № 3 (15) 2007.
Лапин С.В., Маслянский А.Л., Иливанова Е.П., Мазуров В.И., Тотолян А.А. Клиническое значение антител к цикли-ческому цитруллированному пептиду при раннем ревматоидном артрите. // Медицинская Иммунология. 2004, Т. 6, №1-2, стр 57-66.
О.Б. Яременко, А.М. Микитенко. Диагностика ревматоидного артрита на ранних стадиях. //Кафедра госпитальной терапии № 1 Национального медицинского университета им. А.А. Богомольца, г. Киев.
Alessandri C., Bombardieri M., Papa N. et al. Decrease of anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatoid factor following anti-TNFa therapy (infliximab) in rheumatoid arthritis is associated with clinical improvement // Ann. Rheum. Dis. — 2004. — Vol. 63. — P. 1218-1221.
American College of Rheumatology Subcommittee on Rheumatoid Arthritis Guidelines. (2002) Guidelines for the manage-ment of rheumatoid arthritis. 2002 Update // Arthritis Rheum. — 2002. — Vol. 46. — P. 328-346.
Bobbio-Pallavicini F., Alpini C., Caporali R. et al. Autoantibody profile in rheumatoid arthritis during long-term infliximab treatment // Arthritis Res. Ther. — 2004. — Vol. 6. — P. R264-R272.
Chen H.A., Lin K.C., Chen C.H. et al. The effect of etanercept on anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatois factor in patients with rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. — 2006. — Vol. 65. — P. 35-39.
De Rycke L., Verhelst X., Kruithof E. et al. Rheumatoid factor, but not anti-citrullinated protein antibodies, is modulated by infliximab treatment in rheumatoid arthritis // Ann. Rheum. Dis. — 2005. — Vol. 64. — P. 299-302.
De Vries-Bouwstra J.K., Goekoop-Ruiterman Y.P.M., Van Zeben D. et al. A comparison of clinical and radiological out-comes of four treatment strategies for early rheumatoid arthritis: results of the BEST trial // Ann. Rheum. Dis. — 2004. — Vol. 63 (suppl. 1). — P. 58.
Emery P., Breedveld F.C., Dougados M. et al. Early referral recommendation for newly diagnosed rheumatoid arthritis: evidence based development of a clinical guide // Ann. Rheum. Dis. — 2002. — Vol. 61. — P. 290-297.
Combe B., Landewe R., Lukas C., et al. EULAR recommendations for the management of early arthritis: report of task force of the European Standing Committee for international Clinical Studies including Therapeutics (ESCISIT).// Ann Rheum Dis 2007; 66; 34-45.